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熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)和照明選擇

更新時間:2015-10-23      點擊次數(shù):512
   在熒光顯微鏡中,熒光光源裝置是提供一定波長的激發(fā)光使標(biāo)本受激發(fā)射熒光,再通過顯微鏡的物鏡,B鏡系統(tǒng)使熒光圖象放大以供觀察,因此,一般來說,任何顯微鏡都可以用于熒光顯微術(shù)。

  濾色系統(tǒng)是徠卡熒光顯微鏡的重要部分,它由激發(fā)濾片(*相片)和抑制濾片(第二濾只)所組成。前者提供一定波長范圍的激發(fā)光,后者提供相應(yīng)波長范圍的熒光。其玻片通常用有色玻璃組成。其型號各國均不相同。

  熒光顯微鏡激發(fā)濾片根據(jù)光源和熒光色突的特點,可分為露外光激發(fā)濾片,紫氏光激發(fā)濾片和紫外藍(lán)光激發(fā)濾片。熒光顯微鏡所需激發(fā)濾片的厚度,主要根據(jù)所用顯微鏡激發(fā)方式而定,暗場熒光顯微術(shù)要求激發(fā)濾片薄一些,明場時則要求厚一些,因為使用暗場時激發(fā)光不會按進入物鏡,另外還得考慮標(biāo)本情況和目的性,基本原則是以獲得明亮的熒光相的背景襯托為準(zhǔn)。

  熒光顯微鏡抑制濾片的選擇,主要根據(jù)激發(fā)濾只而定。其原則是以*吸收激發(fā)光為目的,透過任何可見光(*互補)以保護眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發(fā)濾片相對應(yīng),抑制濾片也可分為:紫外光抑制濾片、紫藍(lán)光抑制濾片和紫外驗光抑制濾址。

  上面介紹了熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)后,再來了解下熒光顯微鏡的照明選擇根據(jù)什么來考慮。

  熒光顯微鏡的照明可根據(jù)聚光器的構(gòu)造和激發(fā)光的波長按以下三點考慮:

  ①從熒光像的反差要求來看,UV激發(fā)暗場聚光器照明。

 ?、谝韵竦牧炼葋砜紤],BV激發(fā)濾光片暗場觀察效率zui高。

 ?、踀V激發(fā)濾光片暗場觀察和BV激發(fā)暗場聚光器照明的特性,可看作介于這兩種照明方法之間,但前者濾光片暗場的性質(zhì)較強,顯示圖像較明亮,反差小;后者因保留暗場光路的性質(zhì),故顯示圖像較暗,而反差有所改善。當(dāng)實際使用熒光顯微鏡時,應(yīng)采用標(biāo)本要求的照明法進行觀察。

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