日本奧林巴斯生物教學(xué)顯微鏡 BX43 的應(yīng)用技術(shù)如下:
奧林巴斯BX43明場(chǎng)觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:將生物樣品制作成薄片或涂片,如植物葉片切片、動(dòng)物組織切片等,放置在載玻片上,蓋上蓋玻片。若觀察液體樣品,可使用懸滴法或涂片法固定在載玻片上。
操作要點(diǎn):放置并連接電源后,打開電源及光源開關(guān),調(diào)節(jié)亮度。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤,從低倍物鏡開始,通過粗調(diào)旋鈕快速移動(dòng)載物臺(tái),再用微調(diào)旋鈕精確調(diào)焦至圖像清晰。
奧林巴斯BX43相差觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對(duì)于活細(xì)胞或未染色的透明樣品,如培養(yǎng)的細(xì)胞、微生物等,直接將其放置在載玻片上,用蓋玻片覆蓋即可。
操作要點(diǎn):安裝相差模塊,確保相差環(huán)板與物鏡相匹配。將樣品放置在載物臺(tái)上,按照明場(chǎng)觀察的方法進(jìn)行初步對(duì)焦。調(diào)節(jié)聚光鏡的高度和孔徑光闌,使相差效果佳,增強(qiáng)樣品對(duì)比度。
奧林巴斯BX43熒光觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對(duì)需要觀察的生物樣品進(jìn)行熒光標(biāo)記,可使用熒光染料對(duì)細(xì)胞中的特定成分進(jìn)行染色,如用 DAPI 染細(xì)胞核;或通過基因工程手段使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,如綠色熒光蛋白(GFP)等。
操作要點(diǎn):安裝熒光模塊,選擇合適的熒光濾光片組,以匹配所使用的熒光染料或熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)。打開熒光光源,調(diào)節(jié)光源強(qiáng)度。將樣品放置在載玻片上,對(duì)焦后觀察熒光信號(hào),注意避免熒光淬滅。
奧林巴斯BX43偏光觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對(duì)于具有雙折射性質(zhì)的樣品,如晶體、纖維等,將其切成薄片或制成適當(dāng)?shù)男螤?,放置在載玻片上。
操作要點(diǎn):安裝偏光模塊,包括起偏器和檢偏器。將樣品放置在載玻片上,先將起偏器和檢偏器的偏振方向調(diào)整為相互垂直,形成暗場(chǎng)背景。轉(zhuǎn)動(dòng)載物臺(tái),觀察樣品在不同角度下的光學(xué)各向異性現(xiàn)象,如晶體的消光、干涉色等。
奧林巴斯BX43暗場(chǎng)觀察技術(shù)
原理:通過聚光器將光線集中在樣本周圍,使直接照射到樣本的光線很少,從而提高了樣本邊緣的對(duì)比度。
操作要點(diǎn):選用合適的暗場(chǎng)聚光鏡,調(diào)節(jié)聚光鏡和光源,使光線以特定角度照射樣品,形成暗場(chǎng)效果,觀察微小顆?;蛲该鳂悠返妮喞图?xì)節(jié)。
圖像記錄與分析技術(shù)
設(shè)備連接:將顯微鏡與攝像頭系統(tǒng)連接,可通過 USB 接口或其他專用接口將攝像頭與計(jì)算機(jī)連接。
操作要點(diǎn):打開圖像采集軟件,設(shè)置采集參數(shù),如分辨率、曝光時(shí)間、增益等。在顯微鏡下觀察到清晰的圖像后,使用軟件中的拍攝功能記錄圖像或視頻。利用圖像分析軟件對(duì)采集到的圖像進(jìn)行測(cè)量、分析。
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